说明书下载植物基因组DNA纯化试剂盒
（离心柱型）
目录号：GF2368
产品内容
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产品组成 |
GF2368 / (20 preps) |
GF2368 / (100 preps) |
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溶液GS1 (Buffer GS1) |
10 ml |
50 ml |
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溶液GS2 (Buffer GS2) |
0.28g（使用前先加1.2 ml 无菌水制备成溶液） |
1.4g（使用前先加6 ml 无菌水制备成溶液） |
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溶液GP (Buffer GP) |
4 ml |
20 ml |
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溶液BC (Buffer BC) |
6 ml（使用前先加入12 ml 无水乙醇） |
30 ml（使用前先加入60 ml无水乙醇） |
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RNase A (10 mg/ml) |
600μl |
1.5ml*2 |
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漂洗液PW (Buffer PW) |
6 ml（使用前先加入24 ml 无水乙醇） |
30 ml（使用前先加入120 ml无水乙醇） |
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洗脱缓冲液TB (Buffer TB) |
15ml |
30ml |
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过滤柱CS1 (Filtration Columns CS1) |
20个 |
100个 |
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吸附柱CG1 (Spin Columns CG1) |
20个 |
100个 |
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收集管(2 ml) (Collection Tubes) |
40个 |
200个 |
储存条件
该试剂盒置于室温（15-25℃）干燥条件下，可保存12个月，更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10min，以溶解沉淀。
产品简介及特点
本试剂盒采用特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲系统，能从多种植物组织中分离纯化高质量基因组DNA，独特的沉淀溶液可以沉淀去除多糖多酚植物样本中的蛋白质、多糖以及酚类等杂质。提取的基因组DNA纯度高，质量稳定可靠。
使用本试剂盒纯化的基因组DNA适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交、芯片检测、高通量测序等实验。
简便快捷：1h内即可获得高纯度的基因组DNA。
适用广泛：适用于多种植物组织，包括多糖多酚植物。
安全无毒：无需苯酚/氯仿等有毒有机试剂。
超纯高效：高效获得高纯度的DNA，可直接用于PCR、酶切、杂交等分子生物学实验。
注意事项
1.样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
2.若溶液GS1或溶液BC中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。
事前准备：
1.溶液GS2制备：按照比例将无菌水加入到GS2浓缩液粉末中,旋涡1min，50℃孵育至完全溶解，得溶液GS2。制备好的溶液GS2长期保存需要储存在4℃。
2.向溶液BC中加入相应体积的无水乙醇，混匀，室温保存。
3.向漂洗液PW中加入相应体积的无水乙醇，混匀，室温保存。
操作步骤
使用前请先在溶液BC和漂洗液PW中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。
1.取植物新鲜组织约100mg或干重组织约30mg，加入液氮充分碾磨。
注意：使用超过推荐量的样品可能堵塞吸附柱，降低回收率和质量。
2.立即将研磨好的粉末迅速转移至1.5ml微量离心管中，并添加360μl溶液GS1、40μl制备好的溶液GS2和25μl RNase A溶液，迅速涡旋混匀。
注意：不要预先混合这些溶液。
注意：为了获得最佳产量，彻底研磨组织，不充分研磨的组织中的DNA可能无法被试剂接触到;为了得到完整的DNA，新鲜组织应在液氮中迅速冷冻并存储在-80℃中。
3.将离心管放在65℃水浴20min，水浴过程中颠倒离心管以混合样品数次。
4.加入130μl溶液GP，涡旋振荡1min，混匀后将离心管置于冰上静置5min，然后12,000rpm(~13,400×g)离心5min。
5.转移上清至过滤柱CS1中（过滤柱CS1放在收集管中），12,000rpm(~13,400×g)离心2min，转移滤液至新的离心管中。
6.向滤液中加入1.5倍体积的“溶液BC（使用前请检查是否已加入无水乙醇）”，充分混匀，此时可能会出现絮状沉淀，但不影响后续DNA的纯化。
例如：对于500μl滤液，加入750μl溶液BC（使用前请检查是否已加入无水乙醇）
7.将上一步所得溶液和絮状沉淀“分次”转移到吸附柱CG1中（吸附柱CG1放在收集管中），12,000rpm (~13,400×g)离心1min，倒掉废液，将吸附柱CG1放入收集管中。
8.向吸附柱CG1中加入700μl漂洗液PW（使用前请检查是否已加入无水乙醇），12,000rpm(~13,400×g)离心1min，丢弃废液，将吸附柱CG1放入收集管中。
9.重复操作步骤8。
10.将吸附柱CG1放回收集管中，12,000rpm(~13,400×g)离心2min，弃收集管，然后将吸附柱CG1转移到新的离心管中，室温晾干5-10min。
注意：乙醇残留会抑制后续的酶反应，所以晾干时要确保乙醇挥发干净，但也不要干燥太长时间，以免难以洗脱DNA。
11.在吸附柱CG1中加入50-200μl洗脱缓冲液TB，室温放置3-5min，12,000rpm(~13,400×g)离心2min，将溶液收集到离心管中。
注意：洗脱缓冲液体积不应少于50μl，体积过小影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱CG1中，室温放置2min，12,000rpm (~13,400×g)离心2min。