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一步法PAGE快捷制备试剂盒(8%)

规格:
125 gels15 gels

产品描述产品FAQs已发表文献

一步法PAGE快捷制备试剂盒

u 产品内容

CAT #. GF1820-06/08/10/12/15

Size.125gels

分离胶A (250ml)

分离胶B (250ml)

浓缩胶A (100ml)

浓缩胶B (100ml 绿色)

改良型促凝剂(2ml*4)

u 产品介绍

本产品为聚丙烯酰胺凝胶电泳( polyacrylamide gel electrophoresis,简称PAGE)制备试剂盒,试剂盒溶液本身不含SDS,所制备的PAGE凝胶可根据电泳缓冲液的不同,用于变性电泳(SDS-PAGE)和非变性电泳(Native-PAGE);试剂盒有6%、8%、10%、12%、15%五个不同浓度,配有改良型促凝剂,凝胶无需添加TEMED,可“一步法”灌胶;本产品选用知名进口品牌高级别试剂作原料,溶液经多重过滤,配置的凝胶具有高效的蛋白转移能力,可保证Western Blot数据的高度可靠性。

u 产品特点

Ø 预混配方,无需计算所需溶液量,无需稀释,只需两种液体等比例混合,简化传统制胶流程;

Ø “一步法”灌胶,灌制分离胶(下层胶)后直接注入浓缩胶(上层胶),无需液封,极大节省制胶时间;

Ø 浓缩胶呈现彩色(绿),点样孔清晰易辨,方便上样;

Ø 凝胶无需添加TEMED,避免恶臭气味,更加安全;

Ø 条带清晰,尤其小分子蛋白质条带比在传统凝胶中更清晰。

u 存储方式(按标签要求分开存储)

本产品常温运输,4℃保存,其中改良型促凝剂需保存于-20℃,保质期12个月。

u 制胶流程:

1、 取等体积的 分离胶A 和 分离胶B 混匀,体积数量参照附表1;

2、 取等体积的 浓缩胶A 和 浓缩胶B 混匀,体积数量参照附表1;

注意:由于染料的特殊理化性质,使用前请摇匀;

3、 向步骤 1 的混合溶液(分离胶)中加入改良型促凝剂(添加量参照附表1),并混合均匀,然后灌入制胶玻璃板中;

注意:①此溶液为过量,请勿全部注入;

②加入改良型促凝剂后需立即混匀,以免局部凝胶;

4、 向步骤 2 的混合溶液(浓缩胶)中加入改良型促凝剂(添加量参照附表1),并混合均匀,无需等待分离胶凝固,即可将混匀后的溶液轻缓注入制胶玻璃板中,插入梳齿;

注意:①灌注浓缩胶溶液一定要轻缓,避免将浓缩胶溶液冲入分离胶;

②加入改良型促凝剂后需立即混匀,以免局部凝胶;

5、 待胶凝固后(约15min),拔去梳齿即可用于电泳。

注意:①请尽量使用新鲜配制的电泳缓冲液;

②胶凝固后上分离胶分界线平整度略弱于传统方法配的胶,但对后续电泳没有影响;

③凝胶和温度密切相关,冬天需要更长凝胶时间;

备注:

⑴ 本产品亦适用于“传统制胶”,即分离胶凝完再灌注浓缩胶;

⑵ 已开盖的改良型促凝剂,可置于4℃保存三个月,效能无变化;

⑶ 在配胶之前,使产品溶液平衡到室温(如室温放置几分钟),可有效避免凝胶中气泡的形成;

⑷ 试剂盒提供了4支改良型促凝剂(2ml/支),方便-20℃保存,避免一整瓶反复冻融影响促凝效果;

⑸ 制备好的凝胶可以用去离子水浸湿的纸巾包裹,并将其储存在一个密封的塑料袋中,4℃可保存一周。

⑹ 每个试剂盒可制备的凝胶数量:

玻璃板大小(9*7cm)

0.75 mm玻璃板

1.0 mm玻璃板

1.5 mm玻璃板

制胶数

125块胶

90块胶

60块胶

u 凝胶浓度选择参考


u 关于电泳电压和电泳时间的说明:

Ø 蛋白条带的分辨率和电泳美观度,与电泳电压高低相关,相对较低的电压,会跑出分辨率更高更美观的条带,但相应电泳时间也更长;本试剂盒最高耐受电压260V,推荐电泳电压为150V—200V;

Ø 电泳时间长短和电压、胶浓度、缓冲液等因素均相关,建议客户根据自己的实验条件和实验目的选择电泳电压;参考电压和时间:180v约50分钟。

附表1:制备胶所需体积列表

0.75mm玻璃板

(n=制备胶个数)

1.0mm玻璃板

(n=制备胶个数)

1.5mm玻璃板

(n=制备胶个数)

浓缩胶

分离胶

浓缩胶

分离胶

浓缩胶

分离胶

分离胶A

/

2 ml x n

/

3 ml x n

/

4 ml x n

分离胶B

/

2 ml x n

/

3 ml x n

/

4 ml x n

浓缩胶A

1 ml x n

/

1 ml x n

/

1.5 ml x n

/

浓缩胶B

1 ml x n

/

1 ml x n

/

1.5ml x n

/

改良型促凝剂

20 µl x n

40 µl x n

20 µl x n

60 µl x n

30 µl x n

80 µl x n