PAGE快捷制备试剂盒

u 产品内容

u 产品介绍

本产品为聚丙烯酰胺凝胶电泳（ polyacrylamide gel electrophoresis，简称PAGE）制备试剂盒，试剂盒溶液本身不含SDS，所制备的PAGE凝胶可根据电泳缓冲液的不同，用于变性电泳（SDS-PAGE）和非变性电泳（Native-PAGE），试剂盒有6%、8%、10%、12%、15%五个不同浓度，配有改良型促凝剂，凝胶过程无需添加TEMED。本产品原料选用“Sigma”高级别试剂，溶液经多重过滤，配置的凝胶具有高效的蛋白转移能力，可保证WesternBlot数据的高度可靠性。

u 产品描述

Ø 预混配方，无需计算所需溶液量，无需稀释，只需两种液体等比例混合，简化传统制胶流程；

Ø 试剂盒配备改良型促凝剂，凝胶过程不用添加TEMED，避免恶毒气味，实验操作更安全、便捷；

Ø 试剂盒配有染料，但不影响浓缩效果，可选择加入，使浓缩胶呈现红色，方便点样；

u 存储方式（按标签要求分开存储）

本产品常温运输，4℃保存，其中改良型促凝剂需保存于-20℃，保质期12个月。

u 制胶流程

如需浓缩胶呈现彩色（方便点样），第一次使用时请把1ml染料加入浓缩胶B中，摇匀。红色染料不影响电泳、染色及转膜等后续实验。

1、 取等体积的 分离胶A 和 分离胶B 混匀，体积数量参照附表1；

2、 向步骤1的混合溶液中加入“改良型促凝剂”（添加量参照附表1），混匀；

注意：加入改良型促凝剂后需立即混匀，以免局部凝胶；

3、 将步骤2的混合溶液注入制胶玻璃板中，使液面和短玻璃板上沿之间的距离比梳齿长0.5cm即可，加入适量水或醇（如异丙醇、正丁醇等）覆盖于分离胶之上；

注意：此步混合溶液（分离胶）为过量，请勿全部注入，可留少许于配胶杯中，以判断胶凝固状况。

4、 待分离胶凝固后(约15min)，倒去上层水或醇；

注意：①当水（醇）和胶之间有一条折射线时，说明胶已凝固；

②凝胶和温度密切相关，冬天需要更长凝胶时间；

5、 取等体积的 浓缩胶A 和 浓缩胶B 混匀，体积数量参照附表1；

6、 向步骤5的混合溶液中加入“改良型促凝剂”（添加量参照附表1），混匀；

注意：加入改良型促凝剂后需立即混匀，以免局部凝胶；

7、 将步骤 6 的混合溶液注入制胶玻璃板中，插入梳齿；

8、 待浓缩胶凝固后（约15min），拔去梳齿即可用于电泳

注意：凝胶和温度密切相关，冬天需要更长凝胶时间；

备注：

1、 已开盖的改良型促凝剂，可置于4℃保存三个月，效能无变化；

2、 试剂盒提供了4支改良型促凝剂（2ml/支），方便-20℃保存，避免一整瓶反复冻融影响实验效果；如发现已开盖使用中的促凝剂催化效果降低，凝胶速度变慢，请更换新的促凝剂

3、 在配胶之前，使产品溶液平衡到室温(如室温放置几分钟)，可有效避免凝胶中气泡的形成；

4、 制备好的凝胶可以用去离子水浸湿的纸巾包裹，并将其储存在一个密封的塑料袋中，4℃可保存一周。

5、 每个试剂盒可制备的凝胶数量：

u 凝胶浓度选择参考

u 关于电泳电压和电泳时间的说明：

Ø 蛋白条带的分辨率和电泳美观度，与电泳电压高低相关，相对较低的电压，会跑出分辨率更高更美观的条带，但相应的电泳时间也更长；本试剂盒最高耐受电压260V，推荐电泳电压为150V—180V。

Ø 电泳时间长短和电压、胶浓度、缓冲液等因素均相关，建议客户根据自己的实验条件和实验目的选择电泳电压；参考电压和时间：160v约50分钟。

附表1：制备胶所需体积列表

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